為貫徹《中華人民共和國環境保護法》和《中華人民共和國水污染防治法》等法律法規,保護和改善生態環境,保障人體健康,黑龍江省生態環境廳制定了《水質 生物毒性的測定 發光細菌快速測定法》地方標準。
本標準規定了水質 生物毒性的測定 發光細菌快速測定法的方法原理、試劑和材料、儀器設備、測定、結果計算和表示及方法的精密度。
本標準方法原理為:水樣在一定的時間和條件下與發光細菌接觸后,發光細菌的發光強度變化與水樣中毒性組分總濃度呈負相關關系,通過生物發光光度計測定水樣與發光細菌接觸一定時間后的發光抑制率來表征水樣的急性毒性水平。
本測定方法用到的試劑和材料有: 所有的試劑除另有說明外,均應為符合國家標準的分析純試劑,蒸餾水或同等純度的水;超純水,常溫保存;氯化汞母液(2000mg/L);復蘇稀釋液(0.85%的氯化鈉溶液);滲透壓液(17%的氯化鈉溶液);青海弧菌 Q67。
本測定方法用到的儀器設備有:生物發光光度計技術規格:可探測光譜范圍,320nm~1000nm;探測結果范圍,0~65535 RLU ;最快檢測時間,5min;相對發光強度,0-200%;可進行ATP測試;測試試管,規格為5ml的反應試管和10ml的測試試管。
本測定方法步驟為:a)分別往三支反應試管中加入2ml的標準品(稀釋液),2ml(1:19-稀釋液:樣品)的陰性質控及2ml(1:19-稀釋液:樣品)的被測水樣;b)待凍干粉復蘇時間到后,分別往反應管中加入50μl凍干粉復蘇試劑(注意混勻);c)混勻后,等待15min反應時間;d)分別從反應試管中移取350μl混合液至測試管中(注意盡量不要濺到瓶壁上);e)將測試試管按順序分別放入到主機中,最終結果以RLI%發光強度表示。
本標準適用于工業廢水、納污水體及實驗室條件下可溶性化學物質的水質急性毒性監測。