按照寧夏化學分析測試協(xié)會團體標準工作程序，標準起草組已完成《葡萄酒中花青素的測定 液相色譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法》團體標準征求意見稿的編制工作。現(xiàn)按照寧夏化學分析測試協(xié)會《團體標準制修訂程序》要求，公開征求意見。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020 《標準化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》規(guī)定編寫。起草單位有銀川智慧食品安全檢驗檢測中心(有限公司)、寧夏化學分析測試協(xié)會。
 

　　本文件規(guī)定了葡萄酒中6種花青素含量的液相色譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法。本文件適用葡萄酒中飛燕草色素、矢車菊色素、矮牽牛色素、天竺葵色素、芍藥素、錦葵素含量的測定和確證。
 

　　方法原理：
 

　　試樣經(jīng)乙醇-水的強酸溶液超聲提取花色苷后，經(jīng)沸水浴將花色苷水解成花青素，用液相色譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定，外標法定量。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　1.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配備電噴霧離子源(ESI)。2.分析天平：感量分別為0.01mg和0.01g。3.恒溫水浴鍋。4.超聲波清洗器。
 

　　標準溶液配制：
 

　　1.標準儲備溶液(100ug/mL): 分別準確稱取各標準物1mg 到10mL 容量瓶中，用10%鹽酸甲醇溶液溶解并定容，混合均勻得到100ug/mL 的單標標準儲備液，貯存于棕色密閉玻璃瓶中，于-18℃下保存，有效期3個月。
 

　　2.標準工作液：將單一標準儲備液進行混合后，用10%鹽酸甲醇溶液作為溶劑，并逐級稀釋成0.5ng/mL、1.0ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL。混合標準工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。
 

　　試樣前處理：
 

　　稱取上述樣品1.00g于50mL 具塞刻度試管中，用提取液定容至刻線，混勻1min 后，超聲提取30min。超聲提取后，于沸水浴中水解1h，取出冷卻后，用提取液再次定容，靜止，取上清液，用0.22μm水相濾膜過濾，待測。
 

　　定量測定：
 

　　根據(jù)樣液中被測物含量情況，選定濃度相近的混合標準工作溶液，混合標準工作溶液和待測樣液中 6 種花青素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)。混合標準工作溶液與樣液等體積進樣測定。標準溶液及樣液均按 7.3.1 和 7.3.2 規(guī)定的條件進行測定，如果樣液中與標準溶液相同的保留時間有色譜峰出現(xiàn)，則對其進行確證，飛燕草色素、矢車菊色素、矮牽牛色素、天竺葵色素、芍藥素、錦葵素的參考保留時間見表3。飛燕草色素、矢車菊色素、矮牽牛色素、天竺葵色素、芍藥素、錦葵素標準品的多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)色譜圖參見附錄 A，采用標準曲線外標法定量。
 

　　檢出限及定量限：
 

　　飛燕草色素、錦葵色素、矮牽牛色素檢出限均為50.0g/kg、矢車菊色素、天竺葵色素、芍藥素檢出限均為25.0g/kg。